Charakterisierung des Hamocyanins von Haliotis rubra

Bok av Mark Laible
Bachelorarbeit aus dem Jahr 2006 im Fachbereich Biologie - Zoologie, Note: 1,0, Johannes Gutenberg-Universitt Mainz (Zoologie), Sprache: Deutsch, Abstract: Hmocyanin ist das respiratorische Protein vieler Arthropoden und Mollusken. Obwohl die Arthropoden- und Mollusken-Hmocyanine den gleichen Namen tragen, und es sich bei beiden um extrazellulre Kupferproteine handelt, sind sie nicht nah miteinander verwandt. Vielmehr weisen die Arthropoden- und Mollusken-Hmocyanine grundlegende Unterschiede in der Primr-, Tertir- und Quartrstruktur auf und werden unterschiedlichen Protein-Superfamilien zugeordnet. Das Hmocyanin der Mollusken hat die Form eines Hohlzylinders und besteht aus einer oder mehreren dekameren Grundeinheiten. In der vorliegenden Arbeit wurde das Hmocyanin der marinen Schnecke Haliotis rubra aus der Ordnung Archeogastropoda und der Familie Haliotidae untersucht. Hierzu wurden die zwei Isoformen des Hmocyanins mittels Ionenaustausch-Chromatographie aufgetrennt und durch native-PAGE, SDS-PAGE und 2-dimensionale SDS-PAGE bezglich ihrer biochemischen Eigenschaften charakterisiert. Weiterhin wurden die verschiedenen Aggregationszustnde der beiden Isoformen elektronenmikroskopisch untersucht. Um die Domnenstruktur zu entschlsseln wurde das Hmocyanin partiell proteolytisch verdaut und die erhaltenen Fragmente ber Ionenaustausch-Chromatographie und Gelfiltration aufgetrennt. Die Identifizierung der Domnenstruktur erfolgte schliesslich ber 2-dimensionale crossed-line Immunelektrophorese. Hierdurch konnte die Domnenstruktur entschlsselt werden.