Expression, Aufreinigung Und Charakterisierung Von Rhctgf Und Rrnov : Profunde Biochemie möglicher profibrotischer Markerproteine aus der CCN Familie

Die Familie der CCN-Proteine wird derzeit von 6 Mitgliedern reprsentiert. Das prominenteste Mitglied, CTGF, ein downstream mediator' des TGF-1 Signalweges, wurde als ein mglicher Marker fr die Diagnose fibrosierender Erkrankungen erkannt. Aufgrund der entgegengesetzten Wirkung bezglich der Matrixproteinsynthese und der Expression des jeweils anderen Proteins zeigen CTGF und NOV in vitro eine Art Ying/Yang Beziehung. Zur Untersuchung von strukturellen Details sowie der biologischen Funktion beider Proteine wurden zwei Strategien verfolgt. Zum einen wurden im Rahmen dieser Arbeit stabil transfizierte 293 Zellklone fr die Expression von hCTGF etabliert. Zum anderen wurde rNOV mit Hilfe eines adenoviralen Expressionssystems in COS-7 Zellen berexprimiert. Die sezernierten, rekombinanten Proteine wurden aus dem Kulturberstand der Zellen isoliert. Es konnten auf diese Art und Weise ausreichende Mengen beider Proteine fr Strukturanalysen und funktionelle Studien aufgereinigt werden. Die vorliegende Arbeit beschreibt die Analyse und Charakterisierung von zwei Mitgliedern der CCN Proteinfamilie und verbindet die Daten mit den zellbiologischen Ergebnisse aus anderen Arbeiten.